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血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法

點(diǎn)擊次數(shù)：15383   發(fā)布時(shí)間：2012/8/3 11:05:43

ELISA試劑盒分析：血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法

實(shí)驗(yàn)原理

　　血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無色*終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，可測(cè)出其含量。
實(shí)驗(yàn)方法
　　材料：
　　1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
　　2．1%H2O2
　　3．10%醋酸溶液
　　4．分光光度計(jì)
　　方法：
　　1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝，離心分離血漿。
　　2．按下表進(jìn)行操作，用分光光度計(jì)，波長(zhǎng)為530nm，以空白管調(diào)零，測(cè)定測(cè)定管的吸光度。

試劑 （ml）
測(cè)定管
空白管
2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
0.5
0.5
患者血漿
0.02
/
1% H2O2
0.5
0.5
混勻后室溫放置10min
10%醋酸溶液
5.0
5.0
室溫放置10min

　　3.計(jì)算公式
　　血漿游離Hb（mg/L）=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
　　參考范圍：0-40mg/L
注意事項(xiàng)
　　1.一切容器避免血紅蛋白污染；
　　2.采血要順利，器皿要干燥，檢測(cè)血漿要新鮮，及時(shí)分離，防止人為溶血；
　　3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性，檢測(cè)時(shí)要小心，廢液要妥善處理，以免污染；
　　4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準(zhǔn)確

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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